Time-resolved spectroscopische imaging using cw excitation (UNS.4538)

The proposal is part of a PIONIER programme whose aim is the development and exploitation of ultra-fast imaging methods in order to follow transient phenomena in biological and non-biological systems on the (sub)millisecond timescale. The system will employ cw excitation of fluorescence in combination with fast sensitive area detection. This scheme will be utilized for fast imaging experiments employing contrast mechanisms based on fluorescence intensity, fluorescence anisotropy, resonant fluorescence energy transfer and fluorescence emmission ratio. A high frame rate image acquisition with single photon detection sensitivity will be achieved on making use of a fast, small area intensified CCD camera.
The system has novel applications for the imaging of fast attachment/detachment processes and the diffusion of protein and enzyme molecules. The developments proposed here can make a major contribution to the understanding of many fast phenomena in biological and material science.

Het project heeft een zeer gevoelige en snelle fluorescentiemicroscoop opgeleverd waarmee 2500 beelden per seconde geregistreerd kunnen worden. De snelheid wordt in de praktijk beperkt door de hoeveelheid beschikbaar fluorescentie signaal. Met de microscoop kon onder andere de diffusie van 'single molecules' in polymeren worden afgebeeld met snelheden tot 200 beelden seconde. Hierbij zijn quantum dots gebruikt als fluorescente labels. Thans wordt de microscoop gebruikt voor de studie van modelmembraansystemen met fluorescent gelabelde membraaneiwitten en in door NWO-ALW gefinancierd onderzoek (Van molecuul tot organisme).

Er zijn 3 universiteiten en 3 bedrijven bij dit project betrokken.